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  VAXIM DNA转染试剂 GeneXPlusTM-1质粒DNA转染试剂         ★★★
VAXIM DNA转染试剂 GeneXPlusTM-1质粒DNA转染试剂
[ 作者:BIOMEDICINE    转贴自:BIOMEDICINE    点击数:1800    更新时间:6/15/2010    文章录入:admin

    GeneXPlusTM-1是由一种中性脂质体与一种带有阳离子的新型脂质体相配而成。Vaxim的此项基因转染新技术,是通过合理的分子设计,遵循细胞内涵体PH平衡和破坏机制而研发的。此试剂在不同的试剂浓度及不同类型细胞中均具有优质的转染性能,且具极低的细胞毒性作用,是一种非常容易掌握的方法,可用于悬浮和粘附细胞株的暂时性转染,同样也可用于稳定转染而产生细胞株,也适合动物原生细胞的体外和动物体内的基因转染。一小瓶GeneXPlusTM-1(0.6 ml)足够150个24孔板的转染。
形态:GeneXPlusTM-1以液体形式保存。 
储藏:4℃保存。
稳定性:GeneXPlusTM-1在4℃条件下至少保存一年。
优点:1.在大部分细胞中具有非常高的转染效率。
2.在有血清和无血清的培养基中都具有卓越的性能。
3. 极低的细胞毒性,最适合于稳定基因转染。
4. 转染方法非常容易掌握,适合所有的实验设计。
5.小鼠体内模型实验,高剂量(3 ml/只)亦无毒性作用。

方法:
用于粘附细胞:在24孔板上以0.5 ml培养基平铺细胞, 密度为5 - 8 x 104/孔且不加抗生素,在37°C, 5% CO2培养箱中培养24-48h后,细胞达到60 – 80%长满盘时开始准备转染。
用于悬浮细胞:在转染前一天将悬浮细胞分开培养于新鲜培养基中,在转染当天,通过离心收取细胞,弃掉培养基,在24孔板上每孔加0.5 ml培养基,接种5.5 – 8.5 x 105个细胞,不添加抗生素,开始准备转染。
a). 取一干净的小离心管,加20 μl不含血清、蛋白质或抗生素的去离子双蒸水中,加
0.8 µg 的DNA,混匀并震荡几秒钟,保持液体不溅到管壁上。
b). 取另一干净的小管,加20 μl去离子双蒸水,加3 - 5 µl 的GeneXPlusTM-1转染
试剂。
c). 将稀释的转染试剂加入到DNA稀释液中,用吸管反复上下混匀6次。
d). 在20 – 25°C的条件下将转染试剂和DNA溶液孵育15 分钟,形成转染复合物。
e). 加60 µl的不含血清和抗生素的DMEM/或RPMI培养基到DNA液体混合物中至终体
积为100 µl。
f). 立即于每孔中逐滴加入转染混合物,震荡确保每孔中的转染混合物分布均匀。
g). 置细胞板于培养箱中培养。
h). 培养有转染混合物的细胞24-48h。
i). 检测细胞暂时性转染基因表达产物。
 
当进行稳定转染而产生细胞株时,细胞转染后,应稀释1:4至1:8,加入筛选培养基,置细胞板于培养箱中培养24-72h,以带抗生素的新鲜培养基替代原有培养基。

备注:GeneXPlusTM-1是Vaxim, Inc. 正在申请专利的产品,仅用于实验室研究。

VAXIM DNA质粒转染试剂欢迎各实验室使用本产品,联系电话:020-87059452 GeneXPlusTM-1质粒DNA转染试剂诚招全国各地代理商!

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