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  原位细胞凋亡(程序死亡)检测试剂盒         
原位细胞凋亡(程序死亡)检测试剂盒
[ 作者:中国生物医药网    转贴自:中国生物医药网    点击数:2776    更新时间:5/20/2006    文章录入:admin
试剂盒产品价格
 
试剂盒名称
货号
规格
零售价(元)
Caspase 3 分光光度法检测试剂盒
KGA-201
10 
300
KGA-202
20  
552
KGA-203
50
1250
KGA-204
100
2250
Caspase 8 分光光度法检测试剂盒
KGA-301
10 
300
KGA-302
20  
552
KGA-303
50 
1250
KGA-304
100  
2250
Caspase 9 分光光度法检测试剂盒
KGA-401
10 
300
KGA-402
20  
552
KGA-403
50  
1250
KGA-404
100  
2250
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒
KGA-701
10 
900
KGA-702
20 
1512
KGA-703
50 
3400
KGA-704
100 
5500
细胞凋亡Hoechst染色试剂盒
KGA-211
100
120
细胞凋亡DNA LADDERING检测试剂盒
KGA-111
50
700
KGA-112
100
1300
活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒
KGA-501
50 
80
KGA-502
100 
150
细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1
 

KGA-601

10 
500
KGA-602
20  
800

KGA-603

50
1600
KGA-604
100
2800
Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒

KGA-101

10 
500

KGA-102

20  
800

KGA-103

50
1680
转录因子凝胶阻抑(Gel Shift)试剂盒
KGS-101
1 KIT                     
1100
抗肿瘤转移金属蛋白酶抑制剂筛选试剂盒
KGA-901
1 KIT
 
400
端粒酶活性检测试剂盒
KGA-411
10
500
 
KGA-412
20
800
 
KGA-413
50
1600
 
KGA-414
100
2800
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
KGA-311
500
140
 
KGA-312
1000
220
Bradford蛋白含量检测试剂盒
KGA-801
15
108
KGA-802
50
180
KGA-803
100
300
Cell cycle kit
KGA-511
20
300
 
KGA-512
50
600
 
 
产品介绍:
细胞凋亡(apoptosis)或程序化细胞死亡(Programmed cell death,PCD)是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定,由基因控制的细胞主动死亡过程,
是许多正常的生理过程所必需的,包括免疫系统的成熟和作用机制、组织器官和肢体的发生、神经系统的发生等过程。在许多病理条件下,凋亡机制的调节失衡起重要的作用,包括出血、中风、心脏病、艾滋病、滋生免疫缺损和中枢神经系统的退行性病变等。在癌基因的研究方面,由于细胞凋亡可由抗癌药物、放射及高热等启动,并且肿瘤细胞具有由于一些癌基因表达即能启动凋亡的内在特性,因此细胞凋亡已引起人们的广泛重视。
常用检测细胞凋亡的方法有数种:
1、形态学检测
(1)基本原理
细胞凋亡是一个形态学概念,对其形态的观察是研究凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起始阶段,染色质固缩、分离并沿核膜分布,细胞质亦发生固缩,但细胞膜依然完整未失去选择透性;在凋亡后期,核染色质断裂为大小不等的片断,与某些细胞器如线粒体一起聚集,为反折的细胞膜所包围,以后逐渐分离,形成凋亡小体;最后,凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞如巨噬细胞、上皮细胞等吞噬、消化。
(2)实验方法
染料有普通光学显微镜采用的苏木精、甲基绿,还有荧光显微镜采用的吖啶橙、Hoechst 33258等等;通过在显微镜下观察细胞核形态以及显色情况来判断凋亡细胞,甚至确定细胞处于凋亡的某个阶段。
(3)相关产品:凯基活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(Cat:KGA-501、502)——可以同时区分出活细胞、凋亡早期细胞、凋亡晚期细胞和死细胞四种状态的细胞。
 
2、磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法)
(1)基本原理
 

销售咨询  Tel:025-52333444  Fax:025-52335544  南京生兴生物技术有限公司     http://www.njsunshine.com/
技术咨询  Tel:025-83111953  Fax:025-83111975  南京凯基生物科技发展有限公司 http://www.keygentec.com.cn/
 
磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期, PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin V是一种分子量为35-

36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin V进行荧光(FITC、
EGFP)标记,以标记了的 Annexin V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将凋亡各期的细胞区分开来。
(2)实验方法
Annexin V与PI匹配使用,将凋亡各期的细胞区分开。分析仪器荧光显微镜或流式细胞仪。
(3)相关产品:凯基Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒(Cat:KGA-101、102、103)——考虑到Annexin V-EGFP与Annexin V-FITC相比,具有更稳定、灵敏的特点,克服了 FITC 荧光容易淬灭的缺点, 所以采用Annexin V-EGFP作为荧光探针。
 
3、Caspase介导的凋亡检测
(1)基本原理
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。在正常状态下,Caspase家族都以无活性的酶原(30~50kD)形式表达,当细胞发生凋亡时Caspase可以被蛋白酶裂解,大亚基和小亚基形成活化的Caspase。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase级联反应,促发细胞凋亡。在目前已知的14种Caspase中,Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9与凋亡的关系最为密切,在细胞凋亡中起执行凋亡的作用。
(2)实验方法
    将Caspase序列特异性的多肽偶联至发色基团,当该底物被特定的caspase剪切后,发色基团即游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,考察caspase的活化程度。若采用荧光物质偶联的特异性多肽,则可通过荧光光度计分析实验结果。另外,在实验过程中可以用凯基公司的凯基Bradford蛋白含量检测试剂盒(CatKGA-801802803来检测蛋白浓度。
 
(3)相关产品
凯基Caspase 3 分光光度法检测试剂盒CatKGA-201202203204
凯基Caspase 8 分光光度法检测试剂盒CatKGA-301302303304
凯基Caspase 9 分光光度法检测试剂盒CatKGA-401402403404
凯基Caspase 2 分光光度法检测试剂盒CatKGA-111112113114
凯基Caspase 6 分光光度法检测试剂盒CatKGA-311312313314
 
4、线粒体膜势能的检测
(1)基本原理
线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。
(2)实验方法
主要以荧光染色为基础来检测线粒体膜电位。常用的JC-1是一种阳离子染料,该染料在正常细胞内聚集在线粒体内,形成多聚体,发鲜红色荧光;而在凋亡细胞内,由于线粒体膜电位的破坏,不能聚集到线粒体内,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
 
 
 
 
 
 
 
分析仪器为荧光显微镜或流式细胞仪。
(3)相关产品:凯基细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(CatKGA-601602603604
 
5TUNEL
(1)基本原理
细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。TUNEL实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离细胞的细胞形态测定,并可检测出极少量的凋亡细胞,在细胞凋亡的研究中被广泛采用。
(2)实验方法
在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端。在适合底物存在下可以产生很强的颜色反应,特异准确地定位出正在凋亡的细胞。根据标记物的不同,分析仪器可以用普通的光学显微镜,也可以用荧光显微镜或流式细胞仪。
(3)相关产品:凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒CatKGA-701702703704
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